글루타민산나트륨을 배양시키기 위하여 배양조에 종균을 접종하여 발효·배양한다.

배양조를 고온으로 살균하기 위하여 증기밸브를 돌려 재킷(jacket)에 증기를 주입한다. 배양조의 상부밸브를 열어 일정량의 배양배지를 투입하고, 살균이 완료되면 냉각수밸브를 열어 배양조의 순환관에 냉각수를 투입하여 종균이 배양할 수 있는 최적온도로 유지한다. 배양조의 뚜껑을 열고 식균기로 실험실에서 배양한 종균을 접종한다. 종균과 배양배지의 혼합이 용이하도록 저속의 교반기를 일정시간동안 가동한다. 배양이 완료되면 본 배양을 하기 위하여 2차 배양배지로 배양액을 이송한다. 본 배양에 적합한 온도와 산도(pH)를 유지하여 배양액 내의 글루타민산나트륨을 축적시킨다.